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流感病毒3小时现形记:标本乘专用电梯进实验室

发布时间:2018-01-02 09:48:45 来源:网络整理

  流感病毒现形记

  目前,北京市已经进入季节性流感等呼吸道传染病的高发季节。特别是进入12月份以来,医疗机构报告的儿童病例数上升幅度较为明显,疫情大部分出现在小学一、二年级和幼儿园。

  医疗机构报告流感样病例

  如果一个患者得了感冒后到医疗机构就诊,医生会根据患者的症状来初步判断是不是属于流感。但确定患者罹患的到底是不是流感,就需要采集咽拭子,然后进行核酸检测。这个让流感病毒“现形”的过程由北京市疾控中心、各区疾控中心和部分医疗机构组成北京传染病监测网络实验室来完成。一旦遇到疫情,疾控的实验室还要在规定时间内采集标本,完成病毒核酸检测。

  北京市疾控中心传染病地方病控制所副所长杨鹏介绍,目前该所已经建立起覆盖全市一级以上医院的传染病关联性病例监测系统、流感样病例监测系统和肠道门诊早期预警监测系统,并在传染病早期预警监测模型研究方面居国内领先地位。以冬季常见的流感为例,现在全市421家一级以上医疗机构每天都会实时上报流感样病例的例数。杨鹏介绍,医疗机构上报流感样病例主要以症状判断为主,这些数据是流感疫情的预警、预测的重要依据。不过,症状上判断属于流感样病例的患者,到底罹患的是普通感冒还是流行性感冒;如果罹患的是流感,到底是哪种型别的病毒导致的,就需要通过实验得到答案。本周,记者走进北京市疾控中心的实验室,在这里见证了一个流感患者的咽拭子标本的检测过程。

  标本乘专用电梯进实验室

  星期二上午,一批来自北京某医院的疑似流感患儿的咽拭子标本被送到了北京市疾控中心。这一批标本一共10份,全部是前一天刚刚采集的。咽拭子标本听起来很神秘,不过看起来一点都不神秘:一个十多厘米长的塑料管中泡着一根几厘米长的棉棒。“采集咽拭子时,工作人员会用压舌板压一下患儿的舌头,随着孩子发出一声‘啊’,棉棒在喉咙里转一圈,采集过程就完成了。”棉棒会被放入管子里,里面的液体是“病毒保存液”。

  采集好的咽拭子标本会被放在小箱内暂时保存。北京市疾控中心传染病地方病控制所主任技师石伟先介绍,病毒对温度很敏感,采集好的咽拭子标本24小时之内需要在4摄氏度的环境中保存;超过24小时后,咽拭子标本必须放在零下70摄氏度的环境中保存。“常规的家用冰箱冷冻层温度一般在零下18摄氏度,在零下20摄氏度左右的条件下,24小时后一部分病毒就会死掉;放在零下70摄氏度的环境中,即使放置一个月,死亡的病毒量也很少,这样能保证存活的病毒足够进行实验。”

  这批标本一共有10支。采集后24小时之内,它们被送到了市疾控中心的“收样室”,并且有了自己的“受理编号”。当然遇到一些传染性很强的病毒,比如SARS病毒、H5N1、H7N9禽流感病毒等,收样过程就会简化——直接送到实验室工作人员手中。

  收样室的工作人员给这批流感咽拭子标本编号后,它们“坐”着专门的物流电梯,来到了市疾控中心实验室的呼吸道组。在这里,技术人员将进行两次检测:一次是核酸检测,目的是为了明确咽拭子中有没有流感病毒,如果有,到底是哪一种流感病毒;第二次是进行病毒培养,通过对流感病毒敏感的细胞或鸡胚来培养病毒,获得纯化的病毒毒株,这些毒株会成为研究病毒各种特性的重要材料,比如进行抗原性变化的检测,可以为次年的流感疫苗病毒毒株选择提供实验室依据。

  石伟先说,目前全市的18家网络实验室承担了大部分检测任务。北京市疾控中心除了进行部分新采集标本的检测、对一些难以判定的标本进行复核检测外,更重要的是对各区疾控中心的监测标本进行质量控制,从而保证全市的标本检测能够保持在同一水准。

  3小时让乙型流感病毒现形

  标本被送到了实验室,很快,实验开始了。

  这批标本拆包后放在架子上立好,静置之后,放到机器开始震荡15秒,“这个过程是保证棉棒上采集的标本能够充分溶解在病毒保存液中。”核对标本上的编号后,这些标本就被送进了病毒实验四室,这里主要完成第二类和第三类呼吸道病毒的提取工作。流感病毒标本检测中,最“危险”的环节是标本管开盖的过程,“这个过程都在生物安全柜中完成。”生物安全柜是一个负压柜,“这样就能保证流感病毒不会扩散到生物柜以外的空间中。”打开盖子,先要对标本进行分装,就是将大采样管中的病毒保存液平均分到3个2毫升的冻存管里,一个用于核酸检测,一个用于病毒分离培养检测,一个留作复核。用于核酸检测的病毒保存液其实只要200微升左右,经过多次过滤,在各种化学试剂的帮助下,包裹在病毒外面的外衣被“撕开”,病毒露出了被包在核心的核酸,这些核酸最后被收集起来的体积只剩60微升了,这就是核酸提取。

  完成核酸检测的提取步骤之后,很快病毒核酸就要被送到机器上进行检测。石伟先说,目前流感常见的病毒主要是四种,分别是甲型H1N1病毒、甲型H3N2病毒以及两种乙型病毒。制备好的病毒融在反应液中,被滴到一个个检测孔中。“检测用量以微升为单位。”石伟先需要用加样枪来操作。她告诉记者,由于每次加注的液体量太少,稍有差池就会影响检测结果,因此,操作时都是二人组合,“一个人加液,一个人监督,保证不出现错误。”

  加入病毒核酸的检测板被送到机器上进行检测。2个小时后,检测结果会显示出来。“你看,如果显示的数据是一条直线,说明标本是阴性的,也就是这个标本没有这种流感病毒;如果显示的数据是一条光滑的S形曲线,证明这种流感病毒是阳性的,可以分析出到底患者感染了哪种流感病毒。”

  历时3个小时,标本中的流感病毒已经彻底现形——原来是一种乙型流感病毒。石伟先说,检测病毒核酸除了可以确定病毒的种类外,还可以检测到病毒的基因序列是否发生变化等。而在另外一间实验室里进行的是针对分离到病毒毒株的抗原性检测,可以判断出病毒在人群中的抗原性是否发生变化。如果人群中抗原性发生了较大变化,说明病毒已经彻底发生了变异,在第二年的流感疫苗制备中,需要重新推荐毒株,从而让疫苗更好地发挥预防作用。

  本报记者贾晓宏

  甘南摄